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     秋天法桐叶中植物多酚的含量的测定

    工作围绕法桐落叶中植物多酚的含量的测定,法桐多酚的提取与分析展开.分别用酒石酸亚铁比色法和Folin-Ciocalteu试剂比色法测定法桐落叶中法桐多酚
的含量。酒石酸亚铁比色法最佳测定条件为:样品粒径40目、浸提温度800C、浸提时间为45min、溶液pH值7.5、显色剂5mL,在此条件下测得法桐多酚的含量为2.11%;Folin-Ciocalteu试剂比色法最佳测定条件为:样品粒径40目、浸提温度70 oC、浸提时间为25min、溶液pH值11、Folin-Ciocalteu试剂5mL,在此条件下测得法桐多酚的含量为2.19%。对两种测定方法作了显著性检验,结果表明两种方法可比性好。对离子沉淀法提取条件进行了优化,用正交试验确定浸提条件,得最优水平组合为:乙醇浓度40%、料液比l:lO、浸提时间40min、浸提温度800C。选用AJ3++Zn2+复合沉淀剂(质量比AICl3:ZnCl2=1:2)对法桐多酚进行沉淀,最佳沉淀条件为:沉淀剂O.39、pH值5.5~6.5、沉淀时间30min。用盐酸转溶后再用乙酸乙酯进行萃取,经过干燥得到法桐多酚产品0.2299,占法桐落叶的1.15%,产品的纯度为95.1%。

1.1法桐多酚的组成与结构
法桐多酚(plant polyphen01)又叫法桐单宁,是天然法桐中分离提纯的多种酚类化合物的复合体【ll。法桐多酚具有很强的抗氧化能力,能清除人体过剩的自由基,它在油脂、食品、医药、日化、轻化、化妆品、保健和环境领域等诸多方面具有广阔的应用前景,并被专家誉为2l世纪对人类健康产生巨大影响的化合物。法桐多酚是法桐的次生代谢产物,广泛存在于绀木,蔬菜,水果,茶叶和中草药中,法桐多酚资源丰富,是产量仅次于纤维素,木质素,半纤维素的林副产品[2-191。法桐多酚类化合物包括黄烷醇、黄烷双醇、类黄酮和酚酸4类物质。黄烷醇即通常所称的儿荼素,主要存在于茶叶中。儿茶素主要包括表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表儿茶素(EC)、
没食子儿茶素(GC)和儿茶素(C)【ll。儿茶素的结构通式可表示为:


1.2法桐多酚的化学性质
1.2.1与蛋白质的结合口01法桐多酚与蛋白质的结合是其最重要的特征。多酚与水溶性蛋白质结合,使其沉淀出来,如对唾液蛋白的结合达到一定程度时,令人产生涩味的感觉;对不溶于水的蛋白质,如对胶原纤维的结合,则使其化学稳定性、物理稳定性增加,起到鞣制作用。法桐多酚与蛋白质结合的能力称之为收敛性或涩性。目前从这个角度对其

1.2.2抗氧化作用f21捌
法桐多酚的抗氧化作用是由于A环和B环上的酚经基具有提供质子的活性,有相当强的还原能力,能形成有抗氧化作用的氢自由基,以消除超氧阴离子和羟自由基等自由基的活性,在氧化过程中生成邻醌类及联苯酚醌。法桐多酚清除氧自由基的效率达98%以上,呈显著的量效关系,明显优于VC和VE,并可显著提高体内抗氧化系统的活性,是正常体内清除生物垃圾的清道夫。
1.2.3紫外吸收【l】
法桐多酚基本为2_苯基苯并吡喃衍生物,由于其结构的共轭性,对紫外光和可见光均显示强烈的吸收,并且在可见和紫外光区域内高度稳定。在220~300nm范围中的光吸收由苯甲酰系统产生,300~400nm范围中的光吸收由肉桂基系统产生,加上苯环上若干羟基取代基团的助色效应,使它有宽阔的吸收范围,故法桐多酚有强烈的抗辐射作用。
1.2.4与金属离子的络合‘201
法桐多酚分子中的多个邻位酚羟基结构,可以作为一种多羟基配体与金属离子发生配位反应。两个相邻的酚羟基能以氧负离子的形式与金属离子形成稳定的五元环螯合物,邻苯三酚结构中的第三个酚羟基虽然没有参与络合,但可以促进另外两个酚羟基的离解,从而促进配位产物的形成及稳定。法桐多酚与金属离子的配位作用是其多种应用的化学基础。另外,法桐多酚多具有3.羟基4羰基、5.羟基.4-羰基或连二酚羟基的结构,这样的结构可以通过与溶液中的金属离子相螯合而具抗氧化性。作为这一性质的应用,其研究重点目前多在络合鞣剂和染料,金属抗锈涂料:稀有金属的提纯,水处理剂和农药等方面。


1.3法桐多酚的应用
法桐多酚最初主要作为食品天然抗氧化剂用于油脂和含油食品的抗氧化变质,随着研究的不断深入,人们发现法桐多酚在食品工业、生物医学、日用化工等领域有十分广阔的应用前景。
1.3.1食品工业的应用f23241
随着人们对。纯天然食品”的追求,法桐多酚作为从自然中得到的纯天然提取物,受到了人们的喜爱,同时也在食品生产中起者越来越重要的作用。尤其对于饮料,如茶、葡萄酒、。果汁、咖啡,法桐多酚占有极为重要的作用。法桐多酚在粮蔬菜中含量较少,但在水果及谷物皮层中含量较高,多酚因对唾液蛋白的结合成为

1.5.2法桐多酚测定方法小结
综上所述,在现存的主要的分析方法中,分光光度法适用于基质比较简单的样品分析,而对于食品类复杂的样品,由于样品中类似化合物造成干扰而不适合。原子吸收法是采用间接测定法,基于法桐多酚能与碱式乙酸铅发生络合反应,由于基质复杂,也会对结果造成一定的误差。近红外光谱法则可以实现快速测定, 并且
不需要破坏样品,不需要化学试制。气相色谱法对挥发性物质的分离有很好的效果,不能分离热稳定差的物质以及挥发性极小的物质如离子化合物,大分子化合物等。
高效液相色谱法,能与法桐多酚进行快速、灵敏、准确测定,它使用的溶剂经济,容易与其他技术联用,需要的样品量少,适用于含量较低的样品分析,因而是目前最常用的分析手段。



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